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研究文章
局部植物对过氧化氢氧化胁迫的保护作用

Emad Sabry瓶1 *说Mnaa2.

1.埃及米尼亚大学农学院生物化学系
 2.家政系，Menofia大学具体教育学院，埃及

*通讯作者:Emad Sabry Shaker，埃及米尼亚大学农学院生物化学系，电话：0201224157188;电子邮件:eshaker10@hotmail.com


抽象的

氧化应激已被证明在许多疾病中起作用2.O2.在许多生物系统中。H2.O2.经干果改良，如研究中所述。水果(皮番茄，Nabk和梧桐树)已选择测试过氧化氢H有害作用的潜在影响2.O2.在化学和组织学参数。有价值的干燥植物效应进行了比较，N-乙酰半胱氨酸NAC，标准有价值的化合物。碱性磷酸酶ALP作为肝功能障碍机制的指标，随着H的升高而显著升高2.O2.治疗。NAC表现出显著的改善，其次是梧桐添加剂作为保护剂。另一方面，在过氧化氢诱导下，肾脏肌酐曲线显示出不显著的增加值，NAC是各试验组中最显著的缓解值。过氧化氢(100 mg/kg b.w.)显著降低过氧化氢酶CAT值，氧化应激的丙二醛过氧化指标评分显著高。结果表明，果皮番茄、梧桐树和nabk对CAT和MDA的修复效果不明显。NAC是最有效的抑制H引起的氧化应激的因子2.O2.．雌性大鼠用H2.O2.配合NAC口服注射。果皮对肾小管上皮细胞有轻微的空泡化作用，果皮对肾小球内皮细胞有轻微的空泡化作用。研究发现NAC随后被去乙酰化成Cys，并被认为从细胞中缓慢释放到血液中。皮组大鼠脑组织切片未见组织病理学改变，坏死神经元被干nabk果吞噬。此外，梧桐表现为细胞水肿。

关键字

过氧化氢H2.O2.；皮番茄;Nabk;无花果树;脂质过氧化作用;氧化应激


介绍

在生物系统中，活性氧(Reactive oxygen species, ROS)是通过有氧代谢以及药物、紫外线、电离辐射和污染系统[1]等外源性来源产生的。主要的有害作用是由羟基自由基(OH)引起的。从H生成2.O2.在活性氧组和超氧化物（O2.-)物种产生的氧化还原活性过渡金属[2]存在。si[3]主要研究生理条件下的氧化还原信号，高浓度(>100 nM)导致生物分子的适应性应激反应和损伤。生物体内的内源性和外源性防御机制，如抗氧化酶和非酶性抗氧化化合物，可以限制活性氧水平及其生物损伤[4]。

Lopez-Lazaro[5]解释了过氧化氢与癌症可能的相关性。他将细胞水平的增加与DNA改变、细胞增殖和抗凋亡联系起来。氧化应激的关键指标(用丙二醛丙二醛测量脂质过氧化)已被证明在高强度训练后血浆[6]立即增加。未补充维生素的受试者在剧烈运动24小时后血浆MDA水平继续升高。

n -乙酰半胱氨酸(NAC)在临床应用已有几十年的历史。它已被用于许多疾病的治疗，如对乙酰氨基酚(扑热息痛)中毒、心脏缺血-再灌注损伤、急性呼吸窘迫综合征、重金属毒性和化疗毒性[7]。它通过增加谷胱甘肽水平和与扑热息痛的有毒分解产物结合而起作用。乙酰化的l -半胱氨酸前体毒性相对较低，30%的药物可通过肾排泄[8]清除。低于5%的NAC被认为与肠道黏膜的n -去乙酰化和肝脏[9]的首过代谢有关。它被列入世界卫生组织的基本药物清单，基本药物是卫生系统所需的最有效和最安全的药物。

流行病学研究强烈显示，饮食，多吃水果，蔬菜和谷物淬火自由基[10]在预防慢性疾病和某些类型的癌症至关重要的作用。有益健康的影响主要是由于抗氧化剂的存在，如多酚，类胡萝卜素和花青素。最近，Okoko和ERE的调查了番木瓜叶提取物通过减少硫化氢具有抗氧化剂和自由基清除能力2.O2.诱导的红细胞溶血和脂质过氧化比较抗坏血酸[11]。

此外，Ajila和Rao检测了芒果皮提取物作为抑制剂对H2.O2.[12]. 研究发现，作为一种降胆固醇药物，洛伐他汀对H2.O2.在大鼠中诱导的氧化应激[13]。我们的研究调查一些干燥neutrient水果如金色浆果或稻壳番茄，奈卜克和桑树背离过氧化氢产生的氧化应激的重要性。这些本地水果必须在光线declear作为天然抗氧化剂的重要性。在我们的研究数据与标准的宝贵N-乙酰半胱氨酸来衡量陶醉大鼠的潜在重要性进行了比较。

方法

生物试验采用[14]方程测定增重体增重和饲料效率比FER;

BWG=(最终重量-初始重量)/实验天数

FER=日增重（g）/日摄食量（g）×100

过氧化氢H2.O2.购自联合化学公司。地中海,摘要。， n -乙酰半胱氨酸购自SEDICO制药工业公司。

生物学实验42只雌性Sprague-Dawley大鼠，体重120±5 g，购自埃及吉萨眼科研究所。动物经过2周的适应期，在此期间，随机喂食标准鼠粮[15]，昼夜交替12小时，环境温度保持在21- 25℃。所有研究均按照吉萨眼科研究所2015年通过并公布的《实验动物护理和使用指南》进行。

植物材料;三种水果从开罗-埃及的Zaitone市场购买和准备，用蒸馏水清洗以去除任何杂质，并风干。有思想的干果被机械研磨，用于进一步研究。生物实验中使用的果实如下:剥番茄或金色浆果(Physalis pubescens l;酸浆属;鼠李科)和梧桐(无花果;家庭桑科)。

实验分为6组，每组7只;

基团（1）正常对照组用标准鼠食饮食喂养。组（2）老鼠喂食的食物饮食和100mgħ2.O2./ kg体重每日在饮用水中以诱导应力。正如在文献中已提到的，LD50为过氧化氢是2000毫克/公斤（口服对小鼠）。组（3）大鼠喂食允许标准饮食和给药口服NAC（100毫克/千克体重）饮用小时，然后允许2.O2.在水里。组供给与干燥稻壳粉末混合标准饮食（200毫克/千克体重）（HS）每日（4）的大鼠和允许喝ħ2.O2.在水里。(5)组大鼠每日用标准饲料混合干Nabk (200 mg/kg bw) (Nb)喂养，并饮用H2.O2.在水里。(6)组大鼠每日多饲喂标准饲料(200 mg/kg bw) (Sy)，并允许大鼠饮水H2.O2.在水里。使用的浓度是相关研究中预期的。

活动评估:每天监测食物消耗量等生物参数，每周确定一次体重。试验期(5周)结束后，禁食12小时。空腹大鼠处死，取血置于干净的离心管中。血样经凝固后，3000rpm离心20分钟分离血清。分离的血清保存在-20°C，用于后续的生化分析。

生化分析血清肌酐按[16]测定。用[17]比色法测定血清碱性磷酸酶ALP。分别测定碱性磷酸酶(ALP)和肌酐，证实肝肾功能障碍。血浆脂质过氧化值(丙二醛、丙二醛)测定。用肝素抗凝血剂[19]测定血浆中抗氧化标记酶过氧化氢酶CAT。MDA和CAT被认为是氧化应激标志物。血浆在-80°C冷冻，评估在几天内完成。活性定义为H的微量量2.O2.每分钟每毫克蛋白质的减少量。

组织病理学研究取不同实验组大鼠尸体解剖标本。在10%生理盐水溶液中，样品固定24小时。在自来水中洗涤，然后用连续稀释的无水乙醇脱水。然后用二甲苯清理标本，56℃石蜡包埋于热风箱中24小时。石蜡蜂蜡组织块用切片机切片，切片厚度为4微米。取组织切片于玻片上，去脂后苏木精伊红染色，光镜[20]进行组织病理学检查。

使用统计软件包进行社会科学SPSS程序的统计分析[21]中被重复7计算手段，具有它们的标准偏差（±SD）为每个组。应用方差分析丹尼特的事后检验进行统计比较（ANOVA）在5％的概率之间

结果

数据证明了^ h2.O2.显着下降相比，体重和食物效率比显著通过实验（表1）对照组。同时，数据表明，稻壳番茄接着NAC群体改善引起由H感应2.O2.中毒。

组 伯明翰线规(g)
平均数±标准差		 平均±标准差 高山(IU / l) 肌酸酐（毫克/分升）
控制 72.6±9.711A. 12.96 ± 4.554A. 113.29±27.19C 9.00±2.83A.
H2.O2. 54.75±3.961B 9.776±3.804B 229.13±30.60A. 9.33±2.16A.
H2.O2.+南汽 73.4±7.603A. 13.10±5.013A. 107.95±18.59C 6.33±2.86B
H2.O2.+海关
 76.2±12.133A. 13.607±6.663A. 163.71±69.81B 7.33±2.16A.
H2.O2.+注
 64 ± 3.464ab 11.42±4.321ab 156.49±32.63B 7.00±1.22A.
H2.O2.+ SY
 70.6±13.334A. 12.607±66.671A. 131.13±48.48B 9.67±3.89A.
F 3.73 3.73 5.798 1.382
团体。 0.012** 0.012** ０．００１ 0.266

表1:过氧化氢中毒及保护组对增重(BWG g)、食物效率(FER)、碱性磷酸酶(IU/l)、肌酐(mg/dl)的影响
每组7只大鼠[均值±标准差]。

碱性磷酸酶ALP作为肝功能障碍机制的指标，随着H的升高而显著升高2.O2.治疗相比对照组。NAC根据酣过氧化氢处理的组后跟大鼠饮食ALP活性SYCO多种添加剂表现出优异的显著改善。另一方面，在过氧化氢诱导下，肾脏肌酐曲线显示出不显著的增加值，NAC是各试验组中最显著的缓解值。超过在ALP和肌酐值52％和减少32％，分别得到了与NAC口服（表1）治疗的大鼠满足。

如前所述，CAT和GPx可将过氧化物从氧化应激中和到水和氧气中[22]。通过H2.O2.而CAT值的变化是由H诱导引起的2.O2.饮用水管理。从我们的结果来看，MDA氧化应激标记物的增加直接影响了CAT酶值的降低。在相关数据中，过氧化氢单独处理显著降低了CAT值，这是一种常见的抗氧化酶，MDA氧化应激指标评分显著高(表2)。几乎所有暴露在氧气中的生物都能发现CAT。过氧化氢酶是所有酶中转化率最高的酶之一。结果表明，果皮番茄、梧桐和nabk对MDA和CAT均无明显的缓解作用。与受感染的双氧水组和治疗的H组相比，这些数据并不显著2.O2./NAC集团。

组 猫(ᵤMH2.O2./最小/毫克蛋白质）
 MDA (nmol / g组织)
控制 493.18±272.43A. 5.65 ± 1.17B
H2.O2. 303.27±87.47B 12.51±4.84A.
H2.O2.+南汽
 574.28±239.53A. 6.94±2.01B
H2.O2.+海关
 487.93 ± 126.08ab 10.34±4.10ab
H2.O2.+注
 470.65±290.24ab 12.14±0.93A.
H2.O2.+ SY
 335.55±165.19B 10.81±6.75ab
F 1.206 5.47
团体。 0.336 0．002

表2:过氧化氢及保护组对过氧化氢酶CAT(ᵤM H2.O2./ min / mg蛋白）和丙二醛（纳摩尔/ g组织）
每组7只大鼠[均值±SD]

经过氧化氢处理的大鼠肝脏切片显示肝窦扩张、充血和肝门静脉血管充血伴门静脉水肿（图1a）。与正常肝小叶结构相比，也检测到肝窦扩张（图1b）.用H2.O2.伴随着NAC口服注射（图1c）。在另一方面，在稻壳补充饮食增强为H2.O2.无组织病理学改变(图1d)。与此同时，H2.O2.和Nabk水果（图1E）。Sycomore补充饮食与H2.O2.治疗显示肝细胞的轻微vacuolations（图1F）。

图1：对照组（a）大鼠肝脏切片；H2.O2.(b) H2.O2.和南汽(c);与H2.O2.果皮(d);与H2.O2.和奈卜克水果（E）;与H2.O2.和SYCOMORE水果（F）（H和E X 400）

其次，对照组大鼠肾脏切片显示肾实质组织结构正常(图2a)。H组大鼠肾切片2.O2.显示肾小球簇萎缩，鲍曼间隙扩张和局灶性肾出血(图2b)。NAC对H2.O2.显示正常的组织病理学模式(图2c)。果皮作为抗氧化应激的保护剂，可使肾小管上皮细胞轻微空泡化(图2d)。以Nabk补充果实处理组2.O2.部分肾小球簇萎缩(图2e)。另一方面，梧桐树显示肾小球内皮层轻微空泡化(图2f)。

图2：从对照组（A）大鼠肾切片;大鼠肾切片2.O2.(b);大鼠肾切片2.O2.和南汽(c);H2.O2.和去壳水果（d）；H2.O2.和Nabk (e);H2.O2.和SYCOMORE水果（F）（H和E X 400）

对照组大鼠脑切片(图3a)未见组织病理学改变。H组大鼠的脑切片2.O2.H组大鼠脑组织切片显示神经元坏死、细胞水肿、血管周水肿(图3b、3c)2.O2.+NAC显示神经元坏死。在大鼠大脑中，发现转化的NAC随后被去乙酰化为Cys，并被认为从细胞中缓慢释放到血液中[8]。来自果壳组的大鼠脑切片未显示组织病理学变化（图3d），坏死神经元的神经痛与新鲜nabk一起出现（图3e）此外，图（3F）显示组SyCOOL有细胞水肿。

图3:对照组大鼠脑切片(a);(14a,b) H2.O2.(b);H组大鼠脑切片2.O2.+ NAC (c);大鼠皮(d) Nabk组(e)梧桐组(f) (H和e X 400)

讨论

NAC -在测试组中-是最有效的抑制H引起的氧化应激效应的因素2.O2.．虽然NAC不带O反应2.或者不，它与高度氧化的自由基反应，如OH。由过氧化氢和NO生成2.来源于NO，也能结合氧化还原活性金属离子[7]。果皮番茄（酸浆属植物）的果实和叶子是抗氧化剂、抗炎剂、防腐剂和抗癌物质的重要来源，这主要是由于酸浆碱和酸浆内酯的存在[23].NAC被引入临床实践，用于大量报告的研究[8]。口服NAC可快速吸收，但也会经历较长的首次肝脏代谢，从而导致低生物利用度[24]补充半胱氨酸或含半胱氨酸的药物（如NAC）可能是增加细胞内半胱氨酸水平从而促进GSH合成的一种可行方法。NAC或其代谢产物半胱氨酸和GSH可能发挥作用，但是，NAC和半胱氨酸大量代谢为无机硫酸盐和牛磺酸，其在血浆中的氧化形式为其对称的氨基酸硫化物NAC-NAC。

另一方面，Giustarini et al.[9]提到了大剂量NAC在扑热氨中毒中的作用。NAC输注已广泛用于急性肝衰竭，但缺乏令人信服的证据NAC的好处[25]。Salla等人最近研究了植物化学物质对自由基氧化的保护作用。数据与我们的研究结果一致，在HepG2细胞中，诱导氧化应激降低了过氧化氢诱导的氧化应激中的SOD、CAT、GPx活性和GSH水平。氧化应激，首次描述[27]显示严重影响肝脏，肾脏和脑部分。

最近的研究与我们的数据一致，Kang等人表示，传统草药对H2.O2.[28]。过氧化氢通过增加细胞内活性氧的生成导致细胞活力降低，导致DNA损伤和凋亡。墨西哥栽培的果皮番茄的物候和营养潜力已被记录并由[29]证明他们研究了良好的候选种进行育种，并将外壳种开发为具有营养品质的新作物。在最近的封闭保护性研究[30]中，维生素E在提高间充质干细胞修复潜能以对抗H2.O2.诱导的氧化应激。

研究解释说，癌细胞产生大量的H2.O2.[5]，同时有证据表明H2.O2.也能诱导癌细胞凋亡2.O2.可能使肿瘤细胞至H更敏感2.O2.导致的细胞死亡比正常细胞多一般来说，低水平的活性氧是有益的，而过量的活性氧则会促进癌症的发生。研究从化学和组织病理学的检测中发现，某些营养药物对消除或减少癌细胞有很高的效果。


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条信息

文章类型:研究文章

引文：Shaker ES，Mnaa S（2017）一些本地植物对过氧化氢引起的氧化应激的保护作用。环境科学毒理学研究杂志1（1）：doihttp://dx.doi.org/10.16966/2576-6430.104

版权:©2017 Shaker ES等。这是一篇开放获取的文章，在知识共享署名许可协议的条款下发布，该协议允许在任何媒体上无限制地使用、发布和复制，前提是注明原作者和来源。

出版历史：

  • 收到日期:2017年2月23日

  • 接受日期：2017年9月14日

  • 发表日期:2017年9月19日