最近，我们发现未经治疗的HIV感染患者外周血中表达丝氨酸蛋白酶粒酶B (GrB)的调节B细胞计数较高，而穿孔素(抓住细胞)[1]。重要的是,这些抓住细胞能够直接调节T细胞的增殖和存活吗体外和,体内．其作用机制包括grb不依赖穿孔素的转移到T细胞和grb依赖的T细胞受体ζ-链在T细胞中的降解[1,2]。

已知GrB的受体是甘露糖-6-磷酸受体(M6PR, CD222)，它以不依赖穿孔素的方式起作用，已被证明介导GrB的摄取和M6PR表达靶细胞的调控[3,4]。最近的一项研究李斯特菌M6PR在细胞毒T细胞上的差异表达直接与它们的存活和增殖能力[5]有关。因此，M6PR似乎代表了全身感染后T细胞扩展和记忆T细胞形成的一个重要检查点。

在这里，我们报告了我们目前的发现，证实了未经治疗的艾滋病毒感染人类患者的这种机制。由于在缺乏穿孔素的情况下，细胞摄取GrB可以以M6PR依赖的方式发生[3,4]，我们检测了未治疗的HIV患者的T细胞上M6PR的表达，并将其与健康对照组进行了比较。这些实验表明，HIV患者T细胞M6PR的表达明显高于健康对照组(图1和表1)。体外转染孤立的T细胞的健康受试者与艾滋病毒直接证实艾滋病毒触发upregulation M6PR的T细胞(图2)。因此我们的数据表明,艾滋病患者的记忆T细胞室缺陷可能至少部分是由于M6PR的T细胞的表达升高,与这些细胞对grb介导的凋亡和生长阻滞的更高敏感性有关。

表格1：HIV患者的临床，病毒学，安和免疫大学，对抓住细胞和CD222表达CD4进行了测试的健康对照组⁺T细胞。
缩写:F:女性;M:男性;伽马线暴:Granzyme B;MFI:中值荧光强度;厦门市,不可用。

图1:来自未经治疗的艾滋病毒的T细胞⁺与健康人的T细胞相比，患者表达了高水平的M6PR。采用CD3、CD4、CD8和M6PR的荧光标记抗体(CD222)对4例未治疗HIV患者和4例健康对照者的PBMC进行分离和染色。随后,CD4⁺（图1一个)和CD8⁺（图1 b)采用流式细胞仪检测T细胞。CD222表达以人外周血粒为阳性对照。直方图显示了4个具有代表性的实验中的一个具有相似结果的M6PR表面表达(左图)。条形图显示了M6PR的平均百分比⁺来自4个独立实验的T细胞(中间图)和M6PR中值荧光强度(MFI)值(右边图)。误差条表示SEM， *表示p<0.05， **表示p<0.005。

图2:健康人的T细胞在转染野生型NL4-3 HIV后上调甘露糖-6-磷酸受体(M6PR)。CD4.⁺分离来自3个健康个体的T细胞，用CD3 / CD28 Dynabeads和IL-2刺激3天。洗涤细胞并用Nl 4 -3野生型（WT）转染或在37℃下转染6小时。转染后三天，用针对M6PR（CD222）或同种型对照的荧光标记的抗体染色细胞。然后，通过流式细胞术分析T细胞。使用内部ELISA（ABCAM）测试P24蛋白水平的培养上清液。直方图显示使用类似结果（左侧面板）的三个代表实验的M6PR表面表达。条形图显示M6PR中位数荧光强度（MFI）值（中间面板）和P24级别（右图）。误差条表示SEM，*表示P <0.05。

综上所述，我们的研究结果支持了当前的观点，即被细胞内病原体如病毒或细胞内细菌感染后，活化的T细胞在其细胞表面[5]上差异调节M6PR。这种差异的M6PR表达可能不仅解释了调节性T细胞在感染后如何启动效应T细胞收缩阶段，也有其他免疫细胞群表达伽马线暴没有穿孔素如血浆树突细胞或抓住细胞(2、6、7)可以直接抑制T细胞扩张M6PR和GrB-dependent时尚(图3)。调制的M6PR T细胞通过药理手段可能代表一个有前途的新颖的方法来调节T不同感染性疾病包括HIV感染的细胞介导免疫。

图3：来自HIV患者的T细胞的甘露糖-6-磷酸盐受体（M6PR，CD222）介导它们通过Granzyme B分泌调节B细胞抑制它们（抓住细胞)．在HIV感染期间，CD4的T细胞受体（TCR）⁺通过HIV蛋白直接刺激T细胞Nef，不同时共刺激CD28。相对于完全激活的T细胞(左图)，这种未完全激活的T细胞分泌IL-21，但几乎不表达CD40L，从而诱导颗粒酶b分泌抓住细胞而不是Plasmacells（右侧面板，版权所有2015.美国人免疫学家协会)．在HIV感染过程中，随着T细胞上CD222的上调，T细胞对外源性颗粒酶B的吸收被强烈增强，导致其ζ链的剪切增加(放大图)。ζ-链TCR水平较低与此类T细胞增殖能力较低有关。这种恶性循环的打破可能是通过外源性添加CD40L多定时器来实现的，它可以抑制HIV感染期间B细胞/T细胞不完全相互作用后GraB细胞的产生。

参考

1. Kaltenmeier C, Gawanbacht A, Beyer T, Lindner S, Trzaska T, et al. (2015) CD4+ T细胞来源的IL-21和CD40信号的剥夺有利于CD4+ T细胞在活的有机体内表达颗粒酶B的调节B细胞在HIV患者中的发展。J Immunol 194: 3768-3777。［Ref。］
2. Lindner S, Dahlke K, Sontheimer K, Hagn M, Kaltenmeier C, et al.(2013)白介素21诱导的颗粒酶B表达B细胞浸润肿瘤并调节T细胞。癌症研究73:2468-2479。［Ref。］
3. Motyka B, Korbutt G, Pinkoski MJ, Heibein JA, Caputo A, et al.(2000)甘露糖6-磷酸/胰岛素样生长因子II受体是颗粒酶B在细胞毒性T细胞诱导的凋亡中的死亡受体。细胞103:491 - 500。［Ref。］
4. Veugelers K，Motyka B，Goping是，Shostak I，Sawchuk T，等。（2006）颗粒酶B和PETORIN的颗粒介导的杀伤需要甘露糖6-磷酸受体，并通过细胞表面硫酸乙酰肝素增强。Mol Biol蜂窝17：623-633。［Ref。］
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6. Jahrsdörfer B, Vollmer A, Blackwell SE, Maier J, Sontheimer K, et al.(2010)人浆细胞样树突状细胞产生的Granzyme B抑制t细胞膨胀。血115:1156 - 1165。［Ref。］
7. Hagn M, Sontheimer K, Dahlke K, bruegemann S, Kaltenmeier C, et al.(2012)人B细胞在不完全t细胞的帮助下分化为颗粒酶B分泌细胞毒性B淋巴细胞。免疫细胞生物学90:457-467。［Ref。］

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文章类型:短期交流

引文：Kaltenmeier CT, Gawanbacht A, Hotter D, Kirchhoff F, Schrezenmeier H, et al.(2016)甘露糖- 6-磷酸受体，一种新的T细胞扩张检查点，在未治疗的HIV+患者的T细胞上高水平表达。J HIV艾滋病2(3):doi: http://dx.doi.org/10.16966/2380-5536.125

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出版的历史:

收到日期:2015年2月05

接受日期：2016年4月27日

发布日期：2016年5月03