摘要

从埃及Al-Menofia省不同地方采集120只当地新鲜和进口冷冻肉鸡的胸、肝、肾和胗，采用高效液相色谱法测定土霉素(土霉素)和氨苄西林残留的含量。

结果显示，55%、70%、50%、70%、10%和15%的本地肉鸡肉、肝脏、砂囊、肾脏、进口肉鸡肉和肾脏检测样本对OTC残留呈阳性，平均值分别为471.4±33.8、773.9±49.5、11.6±0.9、2676.0±117.5、114.7±8.3和546.7±41.2，而50%、55%、35%、50%、35%%45%的相同样本对氨苄西林残留呈阳性，平均值分别为329.2±20.7、853.3±65.1、164.5±9.8、531.6±37.4、177.9±15.4和323.8±26.6。

各种烹饪方法的应用;煮、炸和烤十烹饪鸡肌肉样品表明,在降低场外残留的浓度产生影响的意思是减少% 84.52%,93.62%和96.58%沸腾后,煎炸,烧烤和81.22%,90.54%和94.5%沸腾后,油炸和烧烤的氨苄青霉素残留浓度。

鸡肉屠体中存在抗生素残留会对消费者的健康造成危害，如抗生素耐药性、致畸性、致癌性、肝肾衰竭。兽医控制家禽养殖场的撤药时间和屠宰屠体的抗生素残留宰后检查是降低风险的重要措施家禽肉中抗生素残留的发生率可以提高鸡肉的质量并保护消费者。

介绍

在家禽中，抗生素被过度用于各种目的，如预防、控制疾病和作为生长兴奋剂，因此，抗生素的使用促进了它们的高效生产，提高了家禽的健康和福祉[1,2]。土霉素（OTC）和氨苄西林是兽医中最常用的预防和控制家禽疾病的常规药物[3]。

不幸的是，在食品生产动物中使用抗生素可能会在动物源性食品（如肉类）中留下残留物，因为没有遵守每种药物的停药期、动物的额外标签剂量、动物饲料被治疗动物的排泄物污染和/或非法使用未经许可的抗生素[4]。食用动物组织中土霉素残留对消费者健康有有害影响，如过敏反应、耐药微生物传播、肝损伤、牙齿变黄、胃肠道紊乱以及可能的诱变和/或致癌作用[5]。而食用肉类中的青霉素残留物最常见的不良反应是过敏反应，尤其是皮疹和胃肠道紊乱，包括腹泻、恶心，有时还会呕吐[6]。监测禽肉中的抗生素残留对控制食品质量和安全非常重要，因此，有几种分析技术可用于测定禽肉组织中的抗生素残留，其中最有效和敏感的是高效液相色谱（HPLC）[7]。使用HPLC技术可以实现组织样品中多残留的相对简单和快速的典型检测[8]。

为确保人类食品安全，世卫组织和粮农组织制定了食品中最大残留限量(MRLs)标准。此外，欧盟(EU)也设立了自己的MRLs[9]。根据粮农组织/世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会[10-12]，非处方西林残留的可接受MRLs在肌肉中为200ug/kg，在肝脏中为600ug/kg，在肾脏中为1200 ug/kg，而在肌肉、肝脏和肾脏中为50ug/kg。通过敏感性试验后给禽鸟使用抗生素，确定准确的剂量，并在停药时间防止屠宰，可实现禽肉抗生素残留的控制。此外，良好的烹饪和冷冻是用来去除大部分抗生素残留;在工业加工中使用的高热和骤冷也可以去除残留[14]。

本研究的目的是通过使用高效液相色谱（HPLC）技术监测抗生素残留（土霉素和氨苄西林），了解本地和进口冷冻肉鸡组织和内脏的安全性，特别提到最常见的烹饪程序（煮沸、油炸和烧烤）对抗生素残留水平的影响。

材料和方法

收集的样本

从埃及Al-Menoufia省不同地方的家禽商店采集120只肉鸡的胸、肝、肾和胗作为本地和进口的冷冻样品，用于土霉素和氨苄西林残留的测定。样品在干净的无菌聚乙烯袋中收集，并立即通过冰盒直接送到实验室。

检验样品中抗生素残留的测定

采用高效液相色谱法测定样品中土霉素和氨苄西林的残留量。

土霉素残留量的测定

所有标本均剪去外部脂肪及筋膜后切成细粒。每个待分析器官取2克，用数字秤称重，切成非常小的块，然后用Sartorius绞肉机磨成细粉，在搅拌机中匀浆2分钟，加入0.1克柠檬酸。在该混合物中分别加入1 ml硝酸(30%)、4 ml甲醇和1 ml去离子水。将含有固体颗粒的悬浮液放入涡流中搅拌均匀，超声浴15分钟，5300 rpm离心10分钟。通过0.45 um尼龙过滤器过滤后，根据Senyuva et al.[15]的方法将20 ul的溶液注射到高效液相色谱中进行分析。

氨苄西林残留量的测定

每个样品用特定的溶剂提取药物

提取:准确地将每个样品放入50 ml加盖的聚丙烯离心管中5±0.01 g，并加入15 ml乙腈/水(15:2)。样品完全均质1分钟，4000rpm离心。取上清液重复匀浆和离心1次。将混合上清液放入圆底烧瓶中，在37℃下蒸发乙腈。在烧瓶中应至少找到大约6毫升剩余上清液。使用磷酸盐缓冲液(pH 8.5)，上清液的总体积应达到20 ml。上清通过再生纤维素，25 mm, 45 um注射器过滤器(安捷伦针5185-5831)过滤。实际上，将10 ml提取液装入安捷伦Sampli Q OPT 6 ml /150 mg cartridge[16]上。

净化：使用0.1%甲酸在水中清洗滤筒，然后使用pH值为8.5的磷酸钾缓冲液。最后，使用3 ml乙腈洗脱样品。使用13 mm、45 ml聚四氟乙烯（PTFE）注射器过滤器（安捷伦针518-5836）过滤样品。在室温下，在氮气下干燥洗脱液。将残留物重新悬浮在流动相中至1.0 ml。将样品旋转2分钟，然后转移至2 ml自动取样器小瓶（安捷伦针5182-0864）[17]。

固相萃取及最终样品制备:将SPE滤筒放入真空歧管系统，SPE滤筒流出物进入溶剂捕集器。准确地说，加入25毫升甲醇、25毫升水和40毫升0.01 M氢氧化钙。对于这些步骤，流速并不重要。此外，将3ml样品以不超过2滴/秒的流速施加到药筒中。在此步骤中不允许干燥滤筒，然后用40 ml蒸馏水和10 ml乙腈冲洗滤筒。用40 ml 2.5%乙酸（包括50%甲醇）连续进行洗脱。使用旋转蒸发器在45°C下蒸发收集的洗脱液，直至完全干燥。干燥后的残留物在3毫升流动相中重新组合。将样品混合并通过0.2µm过滤器过滤，然后注入LC系统。

色谱条件

氧四环素:流动相为0.1%的甲醇和甲酸，采用梯度法，流速为1.5 ml/min。在25°C。采用Hypersil gold C18 (10 um, 100 × 4.6 mm)色谱柱进行分离，流动相如上所述。采用波长为350 nm的PDA检测器进行检测。通过软件(Chromo Quest 5)自动外推曲线下面积，获得并计算样品中残留的定量。

氨苄青霉素:用于抗生素检测的高效液相色谱(HPLC)是德国瓦尔德波隆安捷伦科技(Agilen Technologies, Waldbronn, Dokki)动物健康研究所安捷伦1100高效液相色谱系统，配备g1311a型四元泵、254nm波长紫外检测器(g1314a型)、自动进样器(型号G1329A副ods)和Shim包(150 × 4.6 mm)柱(岛津，京都，日本)。

结果和讨论

从报告的结果表(表1)和数字(图1和2)很明显,氧四环素残留被发现在55%,70%,50%,70%,10%和15%当地肉鸡肉,检查样品的肝、胃、肾,进口肉用鸡肉和肾脏平均值为471.4±33.8,773.9±49.5,11.6±0.9,分别为2676.0±117.5、114.7±8.3和546.7±41.2。目前的结果与Salehzadeh et al.[18]报道的结果一致，后者检测到鸡肝脏和肾脏中土霉素(OTC)的平均浓度分别为576.657±201.908和517.56±186.64 ug/kg。获得的结果高于Cetinkaya等人[19]获得的结果，后者测定了鸡组织中土霉素残留量为17.2 ug/kg。目前的结果低于Salama et al.[20]的记录，后者报告了新鲜鸡胸肉、大腿和肝脏样品中土霉素残留量的最高浓度分别为5812、6010和8148 μg/ kg。

表1：本地及进口冻肉仔鸡及鸡杂样品土霉素、氨苄西林残留量统计分析结果(Ug/Kg) (n=20)
*东南部-标准差均数++-t检验显示差异极显著(P<0.01)

图1:本地和进口冷冻肉鸡肉和内脏样本中土霉素浓度的平均值（ug/kg）。

图2:本地及进口鸡肉及鸡杂样本中氨苄西林浓度平均值(ug/kg)。

图3:根据土霉素残留量对本地及进口冻肉仔鸡肉品样品的可接受性进行分析。
(*MRL根据美国联邦法规，2003年，FAO/WHO, EOSQC, 2008年和食品法典委员会，2012年，**MRL根据EC, 2010年)

否则,氨苄青霉素残留检测到50%,55%,35%,50%,35%和45%的地方烤焙用具的检查样品肉、肝、胃、肾,进口烤肉肉和肾脏平均值为329.2±20.7,853.3±65.1,164.5±9.8,531.6±37.4,177.9±15.4,323.8±26.6,分别。氨苄青霉素残留在样品检查证实的发病率已经被Verdon记录等。[21]利用高效液相色谱法测定氨苄青霉素残留在肾脏,肝脏和肌肉组织和检测极限大约是3-11 ug / kg和定量的限制是评估25 ug / kg。

图3显示了根据土霉素残留水平检测的本地和进口肉鸡肉和内脏样本的可接受性。准确地说，分别有65%、50%、50%和100%的本地肉鸡肉、肝脏、肾脏和砂囊检测样本被接受。而所有进口肉和肾脏检测样本均被接受根据美国联邦法规[22]、FAO/WHO[23]、埃及标准化和质量控制组织“EOSQC”第3692号[10]规定的土霉素最大残留限量（肌肉为200微克/千克，肝脏和胃为600微克/千克，肾脏为1200微克/千克），可接受ys，但不得超过允许限值和食品法典委员会[12]。否则，根据FAO/WHO（1998）[24]和欧洲共同体（EC）[25]估计的土霉素残留的最大残留量（肌肉为100 ug/kg，肝脏和胃为300 ug/kg，肾脏为600 ug/kg），本地肉鸡肉、肝脏、肾脏和砂囊的土霉素残留量合格样本分别为45%、45%、40%和100%。进口肉鸡肉和肾脏的土霉素残留量合格样本分别为90%和95%。图3.土霉素（OTC）AlGhamdi等人[26]可以在鸡组织样本中检测到不同百分比的残余物，他们检测到87%和100%的家禽肌肉和肝脏样本分别含有OTC残余物。

根据氨苄西林残留水平检测的本地肉鸡肉和鸡胚样品的可接受性如图4所示。准确率分别为50%、45%、70%、50%、70%和55%的本地肉鸡肉、肝脏、砂囊、肾脏、进口肉鸡肉和肾脏的检测样品被接受。本研究依据FAO/WHO(1998)[24]、埃及标准化与质量控制组织“EOSQC”No. 3692(2008)[10]、欧洲共同体(EC)(2010)[25]和食品法典委员会(2012)[12]记录的氨苄青霉素最大残留限量(肌、肝、胃、肾各50 ug/kg)。此外，Darwish等人的[27]在18%时可以在组织样品中检测到不同比例的氨苄西林残留。

结果表明，肉鸡肝脏中土霉素和氨苄西林残留量最高。这些结果与Pavlov et al.[28]的报道一致，Pavlov et al.[28]的报道中提到，在肝脏和肾脏中残渣浓度最高，而在皮肤脂肪、腹部脂肪和肌肉中残渣浓度很低。

土霉素和氨苄西林残留量与国产和进口肉鸡肉粒检验样品差异极显著(P<0.01)，见表2。

图5所示的结果表明，不同烹饪方法(煮沸、油炸和烧烤)对检测的鸡肉样品中土霉素和氨苄西林残留的影响。鸡肉中OTC残留量在煮、煎、烤前的平均值为446.16 ug/kg。而经过煮沸、油炸和烧烤后，OTC残留量的降幅平均值分别为84.52%、93.62%和96.58%。

鸡肉中氨苄青霉素残留量在煮、煎、烤前的平均值为253.7 ug/kg。煎炸和烧烤后氨苄西林残留浓度的降幅平均值分别为81.22%、90.54%和94.5%。结果表明，蒸煮、油炸和烧烤等烹饪方法对土霉素和氨苄西林残留的全部或部分降解均有积极作用。因此，采用煮沸、焙烧、油炸和高压灭菌等热处理方法，可能会使所有药物残留[29]全部销毁。因此，使用温度更高、时间更长的适当烹饪工艺可以最大程度地减少食品中的抗生素残留，并为消费者提供额外的安全边际。因此，通过良好的烹煮可以去除大量的抗生素残留，如土霉素和氨苄西林[14]。

结论和建议

结果可以得出结论,当地和冷冻的样品检查进口肉鸡杂碎和组织被证明含有残留的氧四环素和氨苄青霉素尤其是肝脏样本其次是肾脏、肌肉和胃,从而可能构成健康危害动物和人类。此外，不同的烹饪方法(煮沸、油炸和烧烤)的应用对土霉素和氨苄西林的残留有积极的影响，以降解这些检测样品中的残留浓度。

因此，为了改善禽肉的卫生质量，并保障消费者免受禽肉中抗生素残留的不利影响，应在屠宰场进行宰前检验，以排除病禽，并应使用简单的应建立食品中药物残留的主动监测程序，并对肉类进行热处理，使饲料中的抗生素污染物失活。

图4:根据氨苄西林残留量对本地和进口冷冻肉仔鸡肉和内脏的检验样本的可接受性。
(* MRL根据美国联邦法规，2003年，FAO/WHO, EOSQC, 2008年，EC, 2010年和食品法典委员会，2012年)

表2：土霉素和氨苄西林在当地肉鸡肉品和内脏样品中的残留量的方差分析。
++-t检验表明差异极显著(P<0.01)

图5：不同烹饪方法(水煮、油炸和烧烤)对鸡肉中土霉素和氨苄西林残留量的影响(减少%)

参考文献

1. Donoghue DJ(2003)家禽组织和鸡蛋中的抗生素残留:人类健康问题?中国科学(d辑:地球科学)(Ref。］
2. El Nasri HA, Salman AM, Osman IAM(2012)在苏丹喀土穆州使用Disc法和Premi法检测食用鸡蛋中的抗生素残留。堪萨斯大学兽医与动物研究所3:16 -27。(Ref。］
3. Haapapuro ER，Barnard ND，Simon M（1997）综述了用作牲畜饲料的动物废物：对人类健康的危害。《上医学院学报》26:599-602。[Ref。］
4. Paige JC(1994)组织残留分析。FDA兽医9:4 -6。
5. (in 2009)液相色谱-串联质谱-选择性分子印迹固相萃取法测定食品中痕量四环素类抗生素。Anal Bioanal Chem 393: 2009-2018。(Ref。］
6. Medina M，González D，Ramírez A（2008年）动物组织中抗生素残留和猪骨骼中四环素的检测。萨鲁德动物评论30:110-115。[Ref。］
7. Abdullah OA, Shareef AM, Sheet OH(2012)当地牛羊肉中链霉素残留的检测。中国兽医科学26:43-46。(Ref。］
8. berweff AA, Schloesser J(2003)残留测定。在Caballero B, Trugo L, Finglas P (Eds.)，百科全书的食品科学和营养第二版。爱思唯尔,伦敦,英国。(Ref。］
9. Cinquina AL, Longo F, Anastasi G, Giannetti L, Cozzani R(2003)高效液相色谱法测定牛乳和肌肉中土霉素、四环素、金霉素和强力霉素的有效性。色谱仪A 987: 227-233。(Ref。］
10. 埃及标准化和质量控制组织“EOSQC”(2008):食品中兽药的最大残留限量。Es: 3692/2008, Es: 3685/2008。
11. 世界卫生组织/粮食农业组织（世卫组织/粮农组织）（2010年）《食品中兽药残留量（最大残留限量）》，意大利罗马食品法典委员会[Ref。］
12. 食品法典委员会(CAC)(2012)《食品中兽药最大残留限量》，更新于食品法典委员会第35届会议(2012年7月)。食品法典委员会:5-7。(Ref。］
13. Haramaki Y, Sorimachi S, Horie M(1994)高效液相色谱法分析肉和鱼中系统性抗菌物质。J 35: 262- 270。
14. 亚当·杰比(1993)保证牛奶的食物不含残留物。美国兽医协会202:1723-1725。(Ref。］
15. 陈志强，陈志强(2000)高效液相色谱法测定腌制肉制品中土霉素残留量。仪器分析中心。土耳其科学和技术研究理事会(TUBITAK) 06530安卡拉-土耳其。土耳其J化学24:395-400。(Ref。］
16. Heitzman RJ（1994）兽药残留：食品生产动物及其产品中的残留参考材料和方法第二版。威利·布莱克威尔，新加坡[Ref。］
17. Ball C（2008）通过HPLC测定肉类中的青霉素。安捷伦科技公司，美国[Ref。］
18. Salehzadeh F, Madani R, Salehzadeh A, Rokni N, Golchinefar F(2006)伊朗德黑兰屠宰场鸡肉组织中的土霉素残留。巴基斯坦营养杂志5:377-381。(Ref。］
19. (2012)液相色谱-串联质谱法测定鸡肉中四环素残留。食品添加污染B部分监测5:45-49。(Ref。］
20. Salama NA, abu - raya SH, Shalaby AR, Emam WH, Mehaya FM(2011)零售给消费者的鸡肉和肝脏中四环素残留的发生率。食品添加污染B部分监测4:88-93。(Ref。］
21. 关键词:猪素，肌组织，多青霉素，液相色谱法，氨苄西林残留J AOAC Int 85: 889-900。(Ref。］
22. 美国联邦法规（2003）：联邦法规，第21篇，第556部分，第150、500和720节，美国。美国政府出版局，华盛顿特区，美国。
23. 粮农组织/世界卫生组织(粮农组织/世卫组织)(2004年)动物和食品中某些兽药的残留。粮农组织/世卫组织食品添加剂联合出口委员会第六十二份报告。瑞士日内瓦。(Ref。］
24. 粮食农业组织/世界卫生组织(粮农组织/卫生组织)(1998年)评价食品中某些药物残留。粮农组织/世卫组织粮食问题联合专家委员会第四十七份报告，日内瓦，第22-26条。
25. 欧洲共同体(2010)药理活性物质及其在动物源性食品中最大残留限量的分类。J Eur社区15:1-7。(Ref。］
26. al - ghamdi MS, al - mustafa ZH, El-Morsy F, al - faky A, Haider I，等(2000)沙特阿拉伯东部省份家禽产品中四环素化合物的残留。公共卫生4:300 -304。(Ref。］
27. Darwish WS, Eldaly EA, El-Abbasy MT, Ikenaka Y, Nakayama S, et al.(2013)食品中的抗生素残留:非洲情况。日本J兽医Res 61: 13-22。(Ref。］
28. 巴甫洛夫，拉舍夫，瓦钦一，鲁舍夫五（2008）鸡肉和内脏中抗菌药物的残留。特拉基亚期刊Sci 6:23-25[Ref。］
29. 谢梅克，徐旭，廖建伟，曹弗兰杰，黄玉杰，等。（2011）兽医抗生素热稳定性与结构降解、抗菌活性变化和遗传毒性的相关性分析。兽医杂志56:274-285[Ref。］
30. Javadi A（2011）通过微生物方法对烤制、煮沸和微波烹饪方法对家禽食用组织中强力霉素残留的影响。Afr J Pharm Pharmacol 5:1034-1037[Ref。］

在此下载临时PDF

条信息

物品类型：研究文章

引用：Elbagory AM, Yasin NA, Algazar EA(2016)不同烹饪方法对埃及进口和本地冷冻肉鸡及其内脏中部分抗菌残留的影响。营养食品技术2(3):doi http://dx.doi。org/10.16966/2470 - 6086.127

版权：©2016 Elbagory AM等。这是一篇开放获取的文章，在知识共享署名许可协议的条款下发布，该协议允许在任何媒体上无限制地使用、发布和复制，前提是注明原作者和来源。

出版的历史:

收到日期:2016年4月20日

接受日期：2016年6月3日

出版日期：08年6月2016年